【LB培养基配方】LB培养基(Luria-Bertani medium)是一种广泛用于微生物学实验中的基础培养基,特别适用于大肠杆菌(Escherichia coli)等细菌的培养。其配方简单、营养丰富,能够支持多种细菌的生长。以下是LB培养基的标准配方及使用说明。
LB培养基配方总结
LB培养基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone)、酵母提取物(Yeast Extract)和氯化钠(NaCl),这些成分共同为细菌提供碳源、氮源、维生素和矿物质。根据不同的实验需求,LB培养基可以制成液体培养基或固体培养基(添加琼脂)。
以下为标准LB液体培养基的配方:
成分 | 含量(g/L) | 说明 |
胰蛋白胨 | 10 g | 提供氮源和氨基酸 |
酵母提取物 | 5 g | 提供维生素、矿物质和生长因子 |
氯化钠(NaCl) | 10 g | 维持渗透压平衡 |
琼脂(如需制备固体培养基) | 15 g | 作为凝固剂 |
注:若制备固体培养基,可在上述基础上加入15 g/L的琼脂,并在灭菌后冷却至约50°C左右倒入培养皿中。
配制步骤简要
1. 称量:按照上述比例准确称取各成分。
2. 溶解:将所有成分加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。
3. 定容:加入蒸馏水至1 L。
4. 灭菌:将溶液分装后进行高压灭菌(121℃,15 psi,15分钟)。
5. 冷却与使用:灭菌后冷却至适宜温度(通常为50-60℃)后可加入抗生素或其他添加剂(如氨苄青霉素)。
应用与注意事项
- LB培养基适用于大多数革兰氏阴性菌的培养,尤其是大肠杆菌。
- 培养基应储存于4℃冰箱中,避免污染。
- 若需要选择性培养,可在灭菌后加入适当浓度的抗生素。
- 不同实验室可能对配方略有调整,但基本成分保持一致。
通过合理配制和使用,LB培养基能够为微生物实验提供稳定、高效的生长环境。在实际操作中,建议根据具体实验目的对配方进行微调,以获得最佳效果。