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LB培养基的配制

2025-09-15 05:54:50

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2025-09-15 05:54:50

LB培养基的配制】LB培养基(Luria-Bertani medium)是一种广泛用于微生物学实验中的基础液体培养基,特别适用于大肠杆菌等原核生物的培养。其成分简单、营养丰富,能够支持多种细菌的生长。本文将对LB培养基的配制方法进行总结,并以表格形式清晰展示各组分及其用量。

一、LB培养基的组成与作用

LB培养基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone)、酵母提取物(Yeast Extract)和氯化钠(NaCl)。这些成分分别提供碳源、氮源、矿物质和渗透压调节功能,确保细菌在适宜的环境中快速增殖。

成分 作用说明 常用浓度(g/L)
胰蛋白胨 提供氮源和氨基酸 10 g
酵母提取物 提供维生素、矿物质和生长因子 5 g
氯化钠 维持渗透压平衡 10 g
琼脂(若为固体培养基) 固定培养基结构 15–20 g

二、LB培养基的配制步骤

1. 称量原料:根据所需体积准确称取上述各成分。

2. 溶解:将所有成分加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。

3. 调整pH值:使用pH计检测并调整pH至7.0–7.5之间。

4. 灭菌处理:将溶液分装后,在高压灭菌锅中于121℃下灭菌15分钟。

5. 冷却与保存:灭菌后冷却至适当温度,可加入抗生素(如氨苄青霉素)后使用,或置于4℃冰箱保存备用。

三、注意事项

- 配制时应使用无菌操作,避免杂菌污染。

- 若需制备固体培养基,需在灭菌前加入琼脂。

- 不同实验目的可能需要调整配方,例如添加选择性抗生素或特殊营养物质。

- 避免重复使用已灭菌的培养基,以防变质或污染。

通过以上步骤,可以高效、规范地完成LB培养基的配制工作。该培养基因其稳定性强、适用范围广,已成为实验室中不可或缺的基础材料之一。

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