【LB培养基的配制】LB培养基(Luria-Bertani medium)是一种广泛用于微生物学实验中的基础液体培养基,特别适用于大肠杆菌等原核生物的培养。其成分简单、营养丰富,能够支持多种细菌的生长。本文将对LB培养基的配制方法进行总结,并以表格形式清晰展示各组分及其用量。
一、LB培养基的组成与作用
LB培养基的主要成分包括胰蛋白胨(Tryptone)、酵母提取物(Yeast Extract)和氯化钠(NaCl)。这些成分分别提供碳源、氮源、矿物质和渗透压调节功能,确保细菌在适宜的环境中快速增殖。
成分 | 作用说明 | 常用浓度(g/L) |
胰蛋白胨 | 提供氮源和氨基酸 | 10 g |
酵母提取物 | 提供维生素、矿物质和生长因子 | 5 g |
氯化钠 | 维持渗透压平衡 | 10 g |
琼脂(若为固体培养基) | 固定培养基结构 | 15–20 g |
二、LB培养基的配制步骤
1. 称量原料:根据所需体积准确称取上述各成分。
2. 溶解:将所有成分加入适量蒸馏水中,搅拌至完全溶解。
3. 调整pH值:使用pH计检测并调整pH至7.0–7.5之间。
4. 灭菌处理:将溶液分装后,在高压灭菌锅中于121℃下灭菌15分钟。
5. 冷却与保存:灭菌后冷却至适当温度,可加入抗生素(如氨苄青霉素)后使用,或置于4℃冰箱保存备用。
三、注意事项
- 配制时应使用无菌操作,避免杂菌污染。
- 若需制备固体培养基,需在灭菌前加入琼脂。
- 不同实验目的可能需要调整配方,例如添加选择性抗生素或特殊营养物质。
- 避免重复使用已灭菌的培养基,以防变质或污染。
通过以上步骤,可以高效、规范地完成LB培养基的配制工作。该培养基因其稳定性强、适用范围广,已成为实验室中不可或缺的基础材料之一。